《斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析儀校準規范》

由全國生物計量技術(shù)委員會(huì )對口負責的《斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析儀》征求意見(jiàn)稿已經(jīng)起草完成?，F將征求意見(jiàn)稿發(fā)送給各位專(zhuān)家及委員廣泛征求意見(jiàn)。望在百忙之中進(jìn)行評審并提出意見(jiàn)。請將意見(jiàn)寄(或發(fā)電子郵件)給全國生物計量技術(shù)委員會(huì )秘書(shū)處。

??節選該標準部分內容：
??本規范適用于支持 96 孔板的斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析儀的校準。
??斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫技術(shù)(Enzyme-linked immunospot, ELISPOT)結合了細胞培養 技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，在單細胞水平檢測分泌抗體的細胞或分泌細胞 因子的細胞分泌情況，統計斑點(diǎn)形成細胞的數目(即斑點(diǎn)計數)，從而評價(jià)機體 的細胞免疫或體液免疫功能。斑點(diǎn)計數是 ELISPOT 數據處理重要的一步，在 疫苗的臨床評價(jià)中，斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析儀已經(jīng)被強制性用于 ELISPOT 中。

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?斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析儀(以下簡(jiǎn)稱(chēng)分析儀)是對 ELISPOT 板上各孔斑點(diǎn)圖像 進(jìn)行自動(dòng)采集、分析計數的儀器，主要由成像系統、運動(dòng)系統、控制處理系統和 顯示系統組成。分析時(shí)，成像系統獲取 ELISPOT 板上孔內斑點(diǎn)圖像，然后通過(guò) 顯示系統進(jìn)行斑點(diǎn)統計，得到該孔內斑點(diǎn)總數。
??校準用標準物質(zhì) 模擬斑點(diǎn)標準物質(zhì)：孔位與標準 96 孔板一致，結構如附錄 A 所示，其中 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔為定位孔;E3 孔、B6 孔、G6 孔、E9 孔內分別 為 50 個(gè)、100 個(gè)、200 個(gè)、500 個(gè)模擬斑點(diǎn)，相對擴展不確定度均優(yōu)于 1.0%(k=2)。
??校準項目和校準方法
??示值誤差 開(kāi)啟分析儀，按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行調試，將斑點(diǎn)模擬標準物質(zhì)放入分析儀載 物倉并固定，采用 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔進(jìn)行定位后，分別對 E3、B6、 G6、E9 孔拍照并計數，每孔重復測量 3 次，按式(1)計算每孔內斑點(diǎn)個(gè)數的測 量值與標準值之間的相對示值誤差。